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酵母單雜交技術原理

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酵母單雜交技術是一種用於研究蛋白質相互作用關係的實驗技術。其基本原理是利用酵母雙雜交原理,將目標蛋白質的編碼序列與一個激活域融合,構建成“誘餌蛋白質”;同時,將另一個編碼序列與一個DNA結合域融合,構建成“靶蛋白質”。將這兩種融合蛋白質都轉化進入同一酵母細胞中,經過適當培養、篩選,若誘餌蛋白質與靶蛋白質之間存在互相作用(如結合),則這種互作用可以激活某些報告基因(例如LacZ等),從而使酵母細胞具有一定的表型。通過對錶現出這種特殊表型的酵母菌體進行原位雜交等技術,可以進一步證明誘餌蛋白質與靶蛋白質之間存在相互作用關係。多次實驗可得到具有相同相互作用的蛋白質,從而通過分析相互作用的網絡(互作室)來了解蛋白質相互作用的關係。

酵母單雜交技術原理