酵母单杂交技术原理

酵母单杂交技术是一种用于研究蛋白质相互作用关系的实验技术。其基本原理是利用酵母双杂交原理，将目标蛋白质的编码序列与一个激活域融合，构建成“诱饵蛋白质”；同时，将另一个编码序列与一个DNA结合域融合，构建成“靶蛋白质”。将这两种融合蛋白质都转化进入同一酵母细胞中，经过适当培养、筛选，若诱饵蛋白质与靶蛋白质之间存在互相作用（如结合），则这种互作用可以激活某些报告基因（例如LacZ等），从而使酵母细胞具有一定的表型。通过对表现出这种特殊表型的酵母菌体进行原位杂交等技术，可以进一步证明诱饵蛋白质与靶蛋白质之间存在相互作用关系。多次实验可得到具有相同相互作用的蛋白质，从而通过分析相互作用的网络（互作室）来了解蛋白质相互作用的关系。